描述:D-熒光素鉀鹽(GOLDBIO)在熒光素酶(Luciferase)的催化下,與ATP、氧氣反應(yīng)生成氧化熒光素,同時釋放光子(波長約560 nm),產(chǎn)生肉眼可見的生物發(fā)光信號。
一、基礎(chǔ)信息
1. 核心標(biāo)識
- 貨號:LUCK-1G、LUCK-100、LUCK-250、LUCK-300、LUCK-500、LUCK-2G、LUCK-3G、LUCK-4G、LUCK-5G、LUCK-10G
- 中文名:D-熒光素鉀鹽
- 英文名:D-Luciferin, Potassium Salt
- 品牌:GoldBio
- 規(guī)格:1克/瓶(凍干粉形式)
- CAS號:115144-35-9
- 化學(xué)結(jié)構(gòu):屬于雜環(huán)化合物,分子中包含噻唑和苯并噻唑基團,鉀鹽形式確保其在水溶液中的高溶解性。
2. 純度與穩(wěn)定性
- 純度:≥99%(HPLC驗證),雜質(zhì)含量極低(鋅/銅離子<0.0001%),避免非特異性發(fā)光干擾。
- 儲存條件:-20℃避光密封保存,24個月內(nèi)活性保持≥90%;短期可在4℃存放3個月。產(chǎn)品在常溫下運輸穩(wěn)定,無需特殊冷鏈。
- 溶解性:易溶于水(≥50 mg/mL)、DMSO(≥10 mg/mL),微溶于乙醇。預(yù)優(yōu)化的150 mg/mL PBS溶解方案可在10秒內(nèi)溶解,無需過濾除菌。
二、作用原理
D-熒光素鉀鹽(GOLDBIO)的發(fā)光機制基于螢火蟲熒光素酶(Firefly Luciferase)催化的生物化學(xué)反應(yīng):
1. 底物激活:在ATP和鎂離子(Mg2?)存在下,熒光素酶與D-熒光素鉀鹽結(jié)合形成酶-底物復(fù)合物。
2. 氧化脫羧:復(fù)合物在氧氣參與下發(fā)生氧化脫羧反應(yīng),生成氧化熒光素(Oxyluciferin)并釋放二氧化碳。
3. 能量轉(zhuǎn)化:反應(yīng)釋放的化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能,發(fā)射波長為560 nm的黃綠色熒光。當(dāng)?shù)孜镞^量時,光量子數(shù)與熒光素酶濃度呈嚴格線性關(guān)系,從而實現(xiàn)定量檢測。
4. 體內(nèi)成像特性:在37℃生理條件下,熒光波長會紅移至600-620 nm,更適合穿透生物組織,因此可通過生物發(fā)光成像(BLI)技術(shù)對活體動物進行無創(chuàng)監(jiān)測。
三、解決的實驗問題
(一)活體成像領(lǐng)域的核心挑戰(zhàn)
1. 腫瘤轉(zhuǎn)移監(jiān)測:傳統(tǒng)組織切片法無法動態(tài)追蹤腫瘤細胞遷移,而LUCK-1G配合熒光素酶標(biāo)記的腫瘤細胞,可通過BLI實時觀察腫瘤生長、轉(zhuǎn)移及藥物干預(yù)效果。例如,低至10個標(biāo)記細胞的微轉(zhuǎn)移灶即可被檢測到,靈敏度較傳統(tǒng)方法提升10倍。
2. 干細胞治療評估:在干細胞移植研究中,通過監(jiān)測熒光素酶信號可量化干細胞在體內(nèi)的存活、分化及歸巢效率,為細胞治療的療效評估提供直接證據(jù)。
3. 傳染病模型研究:針對細菌或病毒感染模型,LUCK-1G可用于追蹤病原體在宿主體內(nèi)的分布及增殖動態(tài),助力抗感染藥物的研發(fā)。
(二)體外檢測的關(guān)鍵需求
1. 基因表達定量:作為報告基因(如pGL3質(zhì)粒)的底物,LUCK-1G可快速檢測啟動子活性、轉(zhuǎn)錄因子功能及基因編輯效率。其發(fā)光信號強度與熒光素酶表達量直接相關(guān),檢測下限低至0.02 pg,顯著優(yōu)于傳統(tǒng)的β-半乳糖苷酶或GFP報告系統(tǒng)。
2. ATP水平測定:ATP是細胞能量代謝的核心指標(biāo),LUCK-1G通過發(fā)光強度間接反映ATP濃度,可用于細胞活力評估(替代MTT/CCK-8法)、微生物污染檢測及藥物毒性篩選。
3. 高通量篩選優(yōu)化:在藥物研發(fā)中,LUCK-1G支持96孔板或384孔板的自動化檢測,適用于靶向熒光素酶或ATP代謝通路的化合物庫篩選,節(jié)省實驗時間和成本。
(三)實驗操作的痛點突破
1. 低背景干擾:GoldBio的低溫凍干工藝顯著降低氧化雜質(zhì)含量,背景信號<0.05 RLU/μg,確保高信噪比,尤其適用于弱信號樣本(如微量細胞或組織)的檢測。
2. 快速溶解與兼容性:150 mg/mL的高濃度溶液可在10秒內(nèi)溶解,且無需過濾,節(jié)省30分鐘/批次的操作時間。該產(chǎn)品兼容IVIS Spectrum、PerkinElmer IVIS等主流成像系統(tǒng),以及Promega、Thermo Fisher等品牌的熒光素酶檢測試劑盒。
3. 體內(nèi)外通用:鉀鹽形式的高水溶性和生物相容性使其同時適用于動物實驗(如小鼠腹腔注射劑量50-150 mg/kg)和體外細胞實驗,無需額外調(diào)整配方。
四、產(chǎn)品優(yōu)勢
1. 科研級品質(zhì)保障
- 嚴格質(zhì)控:每批次產(chǎn)品通過HPLC、FTIR等9項獨立檢測,并提供包含內(nèi)毒素(<0.1 EU/mg)、無菌性等15+項數(shù)據(jù)的COA(分析證書)。生產(chǎn)過程符合cGMP標(biāo)準,批次間差異極小,實驗重復(fù)性高。
- 背書:產(chǎn)品被超過10,000篇SCI論文引用,涵蓋《Nature》《Cell》等頂級期刊,其可靠性得到全球科研界的廣泛驗證。
- 零重金屬殘留:采用離子交換純化技術(shù),鋅/銅等金屬離子含量低于檢測限,避免對熒光素酶活性產(chǎn)生抑制。
2. 性能
- 高靈敏度:可檢測低至10個標(biāo)記細胞的微轉(zhuǎn)移灶,發(fā)光半衰期>30分鐘,滿足《Nature Protocols》對多時間點成像的要求。
- 穩(wěn)定性:-20℃儲存24個月后活性仍保持90%以上,且在常溫運輸中穩(wěn)定,減少實驗耗材的浪費和物流成本。
- 兼容性廣泛:不僅適配螢火蟲熒光素酶,還可與Renilla熒光素酶等其他報告系統(tǒng)聯(lián)合使用,實現(xiàn)雙熒光素酶報告基因的同步檢測。
3. 實驗效率提升
- 預(yù)優(yōu)化方案:提供即用型的溶解指南和注射參數(shù)(如小鼠10 μL/g體重),縮短實驗準備時間。例如,150 mg/mL的PBS溶液可直接用于活體成像,無需繁瑣的梯度稀釋。
- 簡化操作流程:無需過濾除菌,避免傳統(tǒng)過濾步驟可能導(dǎo)致的底物損失和污染風(fēng)險。同時,溶液可直接分裝凍存于-80℃,減少反復(fù)凍融對活性的影響。
五、客戶群體
1. 科研機構(gòu)與高校實驗室
- 癌癥研究:用于腫瘤細胞標(biāo)記、轉(zhuǎn)移機制研究及新型抗癌藥物開發(fā)。例如,南京大學(xué)宋玉君課題組在《Advanced Materials》的研究中,使用LUCK-1G驗證了氫鍵有機框架的腫瘤靶向能力。
- 神經(jīng)科學(xué):追蹤神經(jīng)元移植后的存活及功能整合,探索神經(jīng)退行性疾病的治療策略。
- 發(fā)育生物學(xué):監(jiān)測基因時空表達模式,解析胚胎發(fā)育過程中的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。
2. 制藥企業(yè)與CRO公司
- 藥物研發(fā)全流程:從早期靶點驗證(如熒光素酶報告基因篩選)到臨床前藥效評估(如小鼠腫瘤模型成像),LUCK-1G貫穿藥物開發(fā)的多個階段。
- 生物制劑開發(fā):用于CAR-T細胞治療、基因療法等新興領(lǐng)域的細胞活性檢測及體內(nèi)分布研究。
- 質(zhì)量控制:在生物制藥生產(chǎn)中,通過ATP檢測評估細胞培養(yǎng)過程中的微生物污染風(fēng)險。
3. 政府及第三方檢測機構(gòu)
- 食品安全:快速檢測食品中的微生物污染(如大腸桿菌、沙門氏菌),替代傳統(tǒng)的培養(yǎng)法,縮短檢測周期至數(shù)小時。
- 環(huán)境監(jiān)測:評估水體或土壤中的微生物活性,為生態(tài)修復(fù)研究提供數(shù)據(jù)支持。
六、訂購流程
- 供應(yīng)商:上海起發(fā)
- 運輸與儲存:產(chǎn)品通過常溫運輸,收到后建議立即儲存于-20℃避光環(huán)境。
七、注意事項
- 避光操作:D-熒光素對光敏感,溶解及使用過程中需避免直接暴露于自然光或強人工光源。
- 避免污染:實驗中需使用無ATP的容器和試劑,防止外源性ATP干擾檢測結(jié)果。
- 動物實驗倫理:在活體成像研究中,需遵循實驗動物福利法規(guī),優(yōu)化麻醉及成像流程以減少動物應(yīng)激。
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?GoldBio熱賣產(chǎn)品
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 品牌 |
LUCNA-250 | D-Luciferin, Sodium Salt (Proven and Published®) | 250mg | GoldBio |
S-140-25 | Spectinomycin Dihydrochloride Pentahydrate, USP Grade | 25g | GoldBio |
XA250 | X-Alpha-Gal | 250mg | GoldBio |
K-120-25 | Kanamycin Monosulfate, USP Grade | 25g | GoldBio |
V-200-25 | Vancomycin Hydrochloride, USP Grade 25g | 25g | GoldBio |
T-104-25 | Timentin™ Ticarcillin/Clavulanate (15/1) | 25g | GoldBio |
P-165-250 | Phosphinothricin | 250mg | GoldBio |
B0178-500MG | Bialaphos | 500MG | GoldBio |
L-010-25 | Leupeptin Hemisulfate 25 mg | 25mg | GoldBio |
P-600-1 | Puromycin Dihydrochloride | 1g | GoldBio |
A-201-1000 | Agarose LE (Molecular Biology Grade) 1 kg | 1kg | GoldBio |
A-655-100 | Aprotinin | 100mg | GoldBio |
S-105-10 | Streptavidin Agarose Resin 10mL | 10mL | GoldBio |
G-725-500 | GelRed™ Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in Water | 500ul | GoldBio |
M-499-250 | 4-Methylumbelliferone | 250g | GoldBio |
O-110-50 | Octylglucoside, Ultra Pure | 50g | GoldBio |
A-230-250 | L-Albizziine 250 mg | 250mg | GoldBio |
MUG1 | MUG | 1g | GoldBio |
B-673-1 | Bluo-Gal | 1g | GoldBio |
eLUCK-100 | D-Luciferin, Potassium Salt (Endotoxin Free) | 100mg | GoldBio |